د 28 درجو سانتي ګراد په تودوخه کې د 25 ورځو جامد انکیوبیشن وروسته، د *Pleurotus ostreatus* NRC620 څخه لاکیس د فنګسي کلتور په منځ کې ترټولو لوړ فعالیت وښود. د دې انزایم لپاره غوره pH او د تودوخې ارزښتونه په ترتیب سره 3.0 او 70 درجو سانتي ګراد وو. په 40 درجو سانتي ګراد او 50 درجو سانتي ګراد کې د 2 ساعتونو انکیوبیشن وروسته، د انزایم فعالیت په ترتیب سره 68.33٪ او 59.61٪ ساتل شوی. د سیټریټ-فاسفیټ بفر (pH 7.0) کې د 2 ساعتونو انکیوبیشن وروسته، د انزایم فعالیت په 100٪ کې پاتې شو. د 10 mM MgSO₄ او CuSO₄ اضافه کول د انزایم فعالیت په ترتیب سره نږدې 21٪ او 35٪ زیات کړ، پداسې حال کې چې NaCl، MnCl₂، KCl، او CaCl₂ د انزایم فعالیت مخنیوی وکړ. د ABTS په کارولو سره د سبسټریټ په توګه، د *Pleurotus ostreatus* NRC 620 laccase د حرکي پیرامیټرونه (Km او Vmax) په ترتیب سره 1.99 mM او 16,217 μmol min−1 L−1 وو. د مڼې د جوس نمونو انزایمیک درملنه د پام وړ pH او واسکاسیټي دواړه کم کړل، او دا کمښت د ذخیره کولو وخت کې زیاتوالي سره تړاو لري. د لاکیس درملنې په پایله کې د مڼې د جوس ټول فینولیک مینځپانګه کې یو څه کمښت راغی، مګر د انټي اکسیډنټ فعالیت کې هیڅ کمښت نه دی لیدل شوی.
په دې وروستیو کلونو کې، څېړونکو د خوړو په صنعت کې د شنه بایو ټیکنالوژۍ په کارولو تمرکز کړی دی. لاکیس د خوړو په صنعت کې یو له خورا ګټورو انزایمونو څخه دی، چې د جوس پروسس کولو، پخولو، د شرابو ثبات، او د خوړو محصولاتو د ارګانولوپټیک کیفیت ښه کولو په برخو کې غوښتنلیکونه موندلي دي.1ډیری لوړ نباتات او مایکرو ارګانیزمونه لیکیس ترشح کوي،2او فنګسي لکه ډیوټرومایسیټس، اسکومایسیټس، او باسیډیومایسیټس هم کولی شي لیکیس تولید کړي.3لاکیس (EC 1.10.3.2) یو نیلي اکسیډیز دی چې د مسو د دریو مختلفو اتومونو څخه جوړ شوي سیسټم په کارولو سره مالیکولي اکسیجن اوبو ته راټیټوي، په دې توګه مختلف فینولیک مرکبات او اروماتیک امینونه اکسیډیز کوي. د میوو او سبزیجاتو جوسونو د تولید په جریان کې، انزایمیک او غیر انزایمیک نسواري کول مهم مسایل دي.4څرنګه چې دا مواد د جوس رنګ، خوند او بوی باندې منفي اغیزه کوي، نو باید لرې شي.5
د ټولو میوو څخه، مڼې په ټوله نړۍ او په اروپايي اتحادیه کې تر ټولو ډیر مصرف کیږي. په ۲۰۱۹ کال کې، د مڼو تولید په نړیواله کچه دریم ځای درلود، چې له ۸۷ ملیون ټنو څخه ډیر و.6مڼې ګڼ شمېر فینولیک مرکبات لري، په شمول د فلاوونایډونو او فینولیک اسیدونو لکه کافیک اسید او کلوروجینک اسید.7څرنګه چې د مڼې جوس معمولا په خپل شفاف شکل کې مصرف کیږي، نو د فلټر کولو پروسې په جریان کې شاوخوا 50٪ څخه تر 90٪ پورې فینولیک اجزا له لاسه ورکوي.8نن ورځ، مصرف کونکي د لږ پروسس شوي محصولاتو غوره کولو ته لیوالتیا لري، لکه د لوړ پولیفینول مینځپانګې سره د ورېځو مڼو جوس. په هرصورت، د لوړ فینولیک مینځپانګې له امله، د مڼو دا ډول جوس په ځانګړي ډول د رنګ بدلولو او تیاره کیدو لپاره حساس دی.9د مڼو د جوس د تیاره کیدو کمولو یا مخنیوي لپاره مختلف ټیکنالوژي کارول کیږي، په شمول د تودوخې درملنې میتودونه لکه د 60-90 درجو سانتي ګراد کې پاسټورایزیشن.10په هرصورت، د Sauceda-Gálvez لخوا د څیړنې له مخې11، حرارتي پروسس کولی شي بې ثباته کیمیاوي مواد له منځه یوسي او د مڼو د جوس ارګانولوپټیک کیفیت اغیزمن کړي. د حرارتي پروسس کولو میتودونو بدیلونو کې سوپرکریټیکل کاربن ډای اکسایډ، الټرا وایلیټ وړانګې، الټراساؤنډ، لوړ هایدروسټاټیک فشار، یا د لوړ فشار همجنسبازي شامل دي.12د دې ټیکنالوژیو موثریت او د مناسبو میوو جوسونو حاصل د کارول شویو پیرامیټرو او د محصول ځانګړتیاو پورې اړه لري. د دوی پراخه کارول د لوړ لګښتونو، د ځینو خوراکي محصولاتو کیفیت باندې منفي اغیزو، یا د انزایمونو ناکافي غیر فعالولو له امله محدود دي.۱۳،۱۴
لاکیس د میوو جوس د ثبات او روښانه کولو لپاره کارول کیدی شي.15ګوکمن او نور.16د میوو د جوس د روښانه کولو لپاره د لاکیس کارولو سپارښتنه کیږي ځکه چې دا په مؤثره توګه فینولیک مرکبات په پولیمرونو یا اولیګومرونو بدلولو سره لرې کوي چې د هر ډول الټرا فلټریشن غشا لخوا په اسانۍ سره لرې کیږي، د مڼې جوس ته اجازه ورکوي چې د 50 درجو سانتي ګراد په تودوخه کې تر شپږو اونیو پورې مستحکم رنګ او شفافیت وساتي. پاک شوی *ټرایکوډرما* لاکیس د ایلومینا مڼو باندې غیر فعال شوی و او د مڼې د جوس د مایکروبیل ککړتیا له امله رامینځته شوي غیر خوندور مرکبات په انتخابي ډول لرې کولو لپاره کارول کیده.17
د مڼې د جوس شاوخوا ۸۰-۹۰٪ بې ثباته اجزا ایسټرونه او الډی هایډونه دي، کوم چې جوس ته یو ځانګړی بوی ورکوي.18د *ټرامیټس ورسیکلر* څخه لاکیس د مڼې د جوس د روښانه کولو لپاره د ځوانو ناریل پوستکو څخه د طبیعي فایبر څخه جوړ شوي ارزانه ملاتړ باندې غیر فعال شو.19پخوانیو مطالعاتو د انزایمونو څخه پاک یا غیر متحرک کولو میتودونو په کارولو سره یا د الټرا فلټریشن سره په ترکیب کې د مڼو د جوس ثبات (رنګ او توربیډیټي) څیړلی دی.۵،۱۹په هرصورت، د ذخیره کولو پرمهال د مڼو د جوس په فزیکو کیمیکل ملکیتونو باندې د فنګسي لیکیسونو اغیزه لاهم روښانه نه ده. له همدې امله، د دې څیړنې موخه دا وه چې د فنګسي لیکیسونو سره د درملنې او دوه اونیو یخچال کې ذخیره کولو وروسته د مڼو د جوس په فزیکو کیمیکل ملکیتونو، فینولیک مرکباتو مینځپانګې او انټي اکسیډنټ فعالیت کې بدلونونه په تجربوي ډول وڅیړي. لیکیسونه د فینولیک مرکباتو اکسیډیز کولو وړتیا لري، کوم چې دوی د مختلفو صنعتي پروسو کې د کارولو لپاره ژمن کوي، پشمول د جوس روښانه کول. دې څیړنې د *Pleurotus ostreatus* NRC 620 څخه لیکیسونه معاینه کړل، د جوس روښانه کولو کې د دوی د فعالیت او اغیزمنتوب لپاره په مثالي شرایطو تمرکز وکړ. پداسې حال کې چې د اویسټر مرخیړیو (P. ostreatus NRC 620) په اړه څیړنه لاهم محدوده ده، پخوانیو مطالعاتو د مختلفو فنګسي سرچینو څخه انزایمونه معاینه کړي، لکه Trametes versicolor او Ganoderma lucidum. د دې څیړنې موخه دا وه چې د خوړو په صنعت کې د دې انزایم احتمالي غوښتنلیک ارزونه وکړي او د هغې ځانګړي ملکیتونه روښانه کړي، په ځانګړې توګه د هغې مثالی pH او تودوخه.
۲،۲′-Azooxybis(۳-ایتیل بینزوتیازولین-۶-سلفونیک اسید) (ABTS) د سیګما-الډریچ (کاناډا) څخه اخیستل شوی و. نور ټول ریجنټونه د تحلیلي درجې وو.
د ملي څیړنې مرکز د مایکروبیل کلتور راټولولو مرکز د اویسټر مشروم پیژندل شوی ډول NRC620 ترلاسه کړ. د فرعي کښت وروسته، دا ډول د کچالو ډیکسټروز اګر سلینټ کې په 4 درجو سانتي ګراد کې زیرمه شو. د انوکولم چمتو کولو طریقه په لاندې ډول وه: 10 ورځې زوړ، په بشپړ ډول وده شوی مایسیلیم د کچالو ډیکسټروز اګر پلیټونو کې واکسین شو او په 28 درجو سانتي ګراد کې انکیوبیټ شو. د 10 ورځو وروسته، د 12 ملي میتر قطر درې مایسیلیل بلاکونه د جراثیمي فلزي پنچ په کارولو سره د اګر میډیا څخه لرې شول او په 250 ملی لیتر ایرلینمیر فلاسکس کې د کاټن پلګونو سره ځای په ځای شول چې 50 ملی لیتر تعقیم شوي کلتور میډیم لري (pH 5.0، لکه څنګه چې مخکې د عثمان او نورو لخوا تشریح شوی.20). کلتورونه د ۱۸ ورځو لپاره په ۲۸ درجو سانتي ګراد کې انکیوبیټ شول. بیا کلتورونه د واټمن نمبر ۱ فلټر کاغذ له لارې فلټر شول، او پایله لرونکی سوپرناټینټ د انزایم سرچینې په توګه کار وکړ.
د لاکیس فعالیت د ABTS په کارولو سره د سبسټریټ په توګه ټاکل شوی و. د تعامل مخلوط (2 ملی لیتر) د 0.3 mM ABTS 500 μL (په 0.1 M سوډیم سیټریټ بفر کې منحل شوی، pH 4.5) او د انزایم نمونې اړین مقدار چې د تقطیر شوي اوبو سره حل شوی و، درلود.۲۱,۲۲د دې په پام کې نیولو سره چې لیکیس کولی شي ABTS د خونې په تودوخه (28 °C ± 2) کې اکسیډیز کړي، د ABTS اکسیډیشن د 420 nm (ε) کې د جذب زیاتوالي اندازه کولو سره ټاکل شوی.۴۲۰= ۳۶۰۰۰ سانتي متره-1 M -1) د Agilent Carry-100 UV سپیکٹروفوټومیټر په کارولو سره. د لاکیس فعالیت یو واحد ته اړتیا وه چې په یوه دقیقه کې 1 μmol ABTS اکسیډیز کړي. د پروټین غلظت د داخلي کنټرول په توګه د غواګانو سیرم البومین په کارولو سره د براډفورډ میتود لخوا ټاکل شوی و.۲۳،۲۴
د اویسټر مشروم سټرین NRC 620 څخه د انزایم ترلاسه کولو وروسته، د هغې فعالیت د 25 ورځو لپاره په مختلفو کښت وقفو کې د جامد شرایطو لاندې د 28 درجو سانتي ګراد په درجه حرارت کې اندازه شو.
د لاکیس فعالیت باندې د تودوخې اغیزې مطالعې لپاره، تجربې د 20 څخه تر 90 درجو سانتي ګراد پورې د تودوخې په حد کې ترسره شوې. د انزایم اضافه کولو او د تعامل پیل کولو دمخه، بفر (0.1 M سوډیم سیټریټ، pH 4.5) او سبسټریټ (ABTS) مخلوط شوي او د 5 دقیقو لپاره په مختلفو تودوخې کې انکیوبیټ شوي. د انزایم حرارتي ثبات د 0.05 M سوډیم فاسفیټ بفر (pH 7.0) کې د 40، 50، 60، او 70 °C کې د 2 ساعتونو لپاره په ترتیب سره د انکیوبیشن لخوا ارزول شوی. بیا د پاتې فعالیت د ABTS سبسټریټ په کارولو سره ارزول شوی.
د لیکیس فعالیت باندې د pH اغیز د ABTS په کارولو سره د 0.1 M سیټریټ-فاسفیټ بفرونو کې د سبسټریټ په توګه ارزول شوی و چې د pH حد یې 2.5 څخه تر 7.0 پورې و. د انزایم محلول د pH ثبات ارزولو لپاره په 0.1 M سیټریټ او ټریس بفرونو (pH 3، 4، 6، او 7) کې د دوو ساعتونو لپاره په 40 درجو سانتی ګراد کې اچول شوی و. د سبسټریټ په توګه د ABTS سره پاتې فعالیت د انکیوبیشن وروسته محاسبه شو.
لاکیس د 10 دقیقو لپاره د سوډیم فاسفیټ بفر (0.05 M، pH 7.0) کې د مختلفو فلزي ایونونو (Mg2+، Cu2+، Co2+، Ca2+، Zn2+، K+، Na+، او Mn2+) په ترتیب سره د 2.5 mM او 10 mM غلظت کې انکیوبیټ شو. بیا سبسټریټ (ABTS) د عکس العمل پیل کولو لپاره اضافه شو، او نسبي فعالیت ارزول شو.
د لاکیس لخوا د ABTS اکسیډیشن په مختلفو غلظتونو (0.025–3 mM) کې د pH 4.5 اندازه شوی ترڅو د متحرک پیرامیټرو (Vmax او Km) مشخص کړي. متحرکثابتونهد مایکلیس-مینټین معادلې د لاین ویور-برک پلاټ په کارولو سره محاسبه شوې، کوم چې د سبسټریټ غلظت د فعالیت په توګه د عکس العمل نرخ متقابل پلاټ کوي. متحرک ثابتونه د ګراف پیډ پریزم نسخه 6.01 سافټویر په کارولو سره د لاین ویور-برک پلاټ څخه محاسبه شوي.
د نل اوبو سره د مڼو په ښه توګه مینځلو وروسته، دوی په نیمایي کې پرې شول او د بشپړ اتوماتیک براون MP80 مڼو جوسر (چې په جرمني کې جوړ شوی) په کارولو سره جوس شو. جوس د پنیر د څلورو طبقو له لارې فلټر شو. د کنټرول ګروپ ته هیڅ انزایمونه اضافه نه شول، پداسې حال کې چې 2.0٪ لاکیس (تر ټولو اغیزمن غلظت ازمول شوی) د تازه چمتو شوي مڼو جوس ته اضافه شو، کوم چې بیا د دوو اونیو لپاره په 4 درجو سانتي ګراد کې زیرمه شو.
د ټایټریټ ایبل اسیدیت (TA) او pH د بولټن او نورو میتودونو سره سم ټاکل شوي.نور ۲۷. د هرې نمونې pH د ډیجیټل pH میټر (JENWAY 3510 pH میټر) په کارولو سره اندازه شو. د ټیټراټیبل اسیدیت (TA) د لاندې فورمول په کارولو سره د مالیک اسید پراساس محاسبه شو.
چیرته چې V او C په ترتیب سره د سوډیم هایدروکسایډ محلول حجم (mL) او غلظت (0.1 mol/L) دی چې په ټایټریشن کې کارول کیږي. K د مالیک اسید د تبادلې ضریب دی، چې د 0.067 سره مساوي دی، او W د مڼې د جوس وزن (g) دی.
د ټولو محلول شویو جامدو موادو (ټي ډي ايس) د ټولو جوس نمونو مینځپانګه د PAL-1 جیب ریفراکټومیټر (ATAGO، ټوکیو، جاپان) په کارولو سره ټاکل شوې. د هرې اندازې وروسته، نظري لینز د ډیونیز شوي اوبو سره مینځل شوی و، او د مڼو د جوس هر نمونه درې ځله ازمول شوې وه. د هرې نمونې ارزښت د دریو اندازه کولو اوسط په واسطه محاسبه شوی و. د مڼو د جوس هر نمونې لپاره اوسط ± معیاري انحراف هم د دې پایلو اوسط په واسطه محاسبه شوی و.
د مڼو د جوس نمونو د ویسکویلاسټیکیت د گردشي ویسکومیټر (RV، ریوټیسټ 2، جرمني) په کارولو سره ارزول شوی. نمونه د ویسکومیټر د "S2" سلنډر دننه ځای په ځای شوې وه. ظاهري ویسکوسیټي د شییر فشار د سلپ په مقابل کې د شییر نرخ منحني لخوا ښودل شوې وه، کوم چې د شییر فشار او اړونده منحني څخه په مختلفو شییر نرخونو کې محاسبه شوې وه (له 1.00 څخه تر 437.4 s⁻¹ پورې). د ظاهري ویسکوسیټي محاسبه کولو فورمول په لاندې ډول دی:
چیرته چې η ښکاره واسکاسیټي (cP) ده، τ د شییر فشار (dyn/cm²) دی، γ د شییر کچه (sec⁻¹) ده، او (τ) د لاندې فورمول په کارولو سره د تورک (α) او سلنډر (Z) ارزښتونو په کارولو سره محاسبه کیږي: τ = Z. α.
د نسواري کولو شاخص د میداو ایټ میتود سره سم ټاکل شوی ونور ۲۹. د ۱۰ ملی لیتره جوس نمونه د ۱۰ دقیقو لپاره په ۲۷۵۰ xg کې سینټرفیوج شوه. د جوس سپرناټینټ ۵ ملی لیتره د ۹۵٪ ایتانول ۵ ملی لیتر سره مخلوط شو. د مخلوط جذب د شیمازو UV سپیکٹروفوټومیټر (UV-1601 PC) په کارولو سره په ۴۲۰ nm کې اندازه شو.
د ټول فینولیک محتوا (TPC) د فولین-سیوکالټیو ریجنټ په کارولو سره د رنګ میټریک په توګه ټاکل شوی لکه څنګه چې د بولټن او نورو لخوا تشریح شوی.[27]]. د ګیلیک اسید یو معیاري منحنی د 0 څخه تر 500 ملی ګرامه/لیتر غلظت لپاره جوړ شوی و (مربع= 0.997). پایلې د ګالیک اسید معادل (mg GAE/mL) په توګه څرګندیږي.
د مڼې جوس په ۲۵ μL کې ۱۲۵ μL مقطري اوبه او ۲۸۵۰ μL FRAP محلول اضافه کړئ او مخلوط په تیاره کې پریږدئ ترڅو30لږ تر لږه. بیا د شیمازو UV سپیکٹروفوټومیټر (UV-1601 PC) په کارولو سره د جذب اندازه په 593 nm کې اندازه کړئ. د FRAP ریجنټ د 300 mM اسټیټ بفر (pH 3.6)، 20 mM اوسپنه (III) کلورایډ، او 10 mM 2,4,6-tris(2-pyridyl)triazine (TPTZ) (په 40 mM HCl کې منحل شوی) د 10:1:1 تناسب سره مخلوط کولو سره چمتو شو. د معیاري په توګه د ټرولوکس په کارولو سره یو معیاري منحنی رامینځته شو (د مربع مترو په اندازه= 0.999)، او پایلې یې د μM Trolox/mL په توګه څرګندیږي.
د درملنې شوي او غیر درملنې شوي جوسونو انټي اکسیډنټ فعالیت د DPPH میتود په کارولو سره ټاکل شوی ترڅو د DPPH آزاد رادیکالونو د پاکولو وړتیا ارزونه وکړي.31لس مایکرو لیټره جوس د میتانول په یوه ملی لیتر DPPH محلول (100 μM) سره مخلوط شول. په تیاره کې د 30 دقیقو لپاره د تعامل وروسته، د مخلوط جذب د شیمازو UV سپیکٹروفوټومیټر (UV-1601 PC) په کارولو سره په 517 nm اندازه شو. پایلې د کیلیبریشن منحني پراساس د ټرولوکس معادل (μM ټرولوکس/ml) په توګه څرګندې شوې (R2= ۰.۹۹۰).
ترلاسه شوي معلومات ښیې چې د تخمر د ۱۸مې ورځې په پای کې د NRC ۶۲۰ اویسټر مرخیړیو کې د لاکیس اعظمي تولید لیدل شوی و، چې د ۱۳۰۲ U/L فعالیت ته رسیدلی و. دا د لاکیس تولید لپاره د غوره کښت وخت ټاکلو لپاره اساس و (شکل ۱). که څه هم د انزایم تولید د کښت وخت زیاتوالي سره زیات شو، د زیاتوالي کچه په مستقیم ډول د کښت وخت سره متناسب نه وه؛ د ۲۱ ورځو وروسته، د انزایم فعالیت یوازې ۹۰ U/L (تر ۱۳۹۰ U/L پورې) زیات شوی و. له همدې امله، ۱۸ ورځې په پای کې د کښت د غوره وخت په توګه وټاکل شوې ترڅو د محصول حاصلات د کښت وخت د زیاتوالي اقتصادي ګټو سره متوازن کړي.
په Pleurotus ostreatus NRC 620 کې د لاکیس حاصلاتو باندې د کښت وخت اغیزه. درې (12 ملي میتر) فنګسي مایسیلیال بلاکونه د 50 ملی لیتر تعقیم شوي میډیم کې واکسین شوي او بیا د مختلفو وختونو لپاره په 28 °C کې کرل شوي.
د نورو مطالعاتو سره په مطابقت کې، زموږ پایلې ښیي چې د فنګسونو لخوا د لیکیس سرایت لوړوالي ته د رسیدو لپاره د کلتور مثالی دوره احتمال لري د 7 او 36 ورځو ترمنځ وي.32د ایزیک او نورو په وینا.33، *ټرامیټس پولیزونا* WRF03 د تخمر د نهمې ورځې په پای کې د لاکاس ترټولو لوړه اندازه تولید کړه، چې د 1637 U/mg پروټین ځانګړي فعالیت سره. سربیره پردې، عثمان او نور.34وموندله چې *ټرایکوډرما هارزیانم* S7113 د کلچر په پنځمه ورځ د لاکیس لویه اندازه پټه کړه. د لاکیس تولید کچه په څوارلسمه ورځ خپل لوړ فعالیت ته ورسیده او بیا په تدریجي ډول کمه شوه.34که څه هم د انزایمونو سرایت د اصلي ودې په مرحله کې هم واقع کیدی شي، دا معمولا د منځنۍ مرحلې په جریان کې خپل اوج ته رسیږي او د کاربن یا نایتروجن سرچینې د مصرف له امله رامینځته کیږي.۳۴,۳۵
که څه هم د Pleurotus ostreatus NRC 620 څخه لاکیس د 50 درجو سانتي ګراد څخه تر 80 درجو سانتي ګراد پورې د تودوخې په پراخه لړۍ کې لوړ فعالیت ښودلی، د فعالیت لوړ حد ته نږدې (69-98٪)، د هغې اعظمي فعالیت په 70 درجو سانتي ګراد کې لیدل شوی (شکل 2a). د دې تودوخې حد څخه بهر، د انزایم فعالیت نږدې 70 درجو سانتي ګراد کې کم شوی. دا پایلې وړاندیز کوي چې انزایم په لوړه تودوخه کې فعال دی، احتمال لري ځکه چې لوړه تودوخه د عکس العمل حرکي انرژي زیاتوي.
د *Pleurotus ostreatus* NRC 620 کې د لیکیس فعالیت باندې د تعامل تودوخې (a) او pH (b) اغیز. د انزایم اضافه کولو او تعامل پیل کولو دمخه د 5 دقیقو لپاره په مختلفو تودوخې کې د مخلوط دمخه انکیوبیټ کولو سره د 20 څخه تر 90 °C پورې تودوخې ترلاسه شوې. د لیکیس فعالیت باندې د pH اغیز د ABTS په کارولو سره د 0.1 M سیټریټ-فاسفیټ بفر لرونکي محلولونو کې د سبسټریټ په توګه ارزول شوی چې د 2.5 څخه تر 7.0 پورې د pH حد کې دی.
د ایزیک او۳۳د *ټرامیټس پولیزونا* WRF03 لاکیس لپاره غوره تودوخه 55 °C ده، کوم چې د *ګانوډرما لوسیډم* لپاره ورته ده.لاکیس ۳۶او د *ټرامیټس پولیزونا* KU-RNW02737 لپاره د مطلوب تودوخې (50 °C) سره ورتهلاکیس . بالډریان ۳۸یادونه کوي چې، د نورو لیګنین تخریبونکي انزایم سیسټمونو په څیر، د لاکیس لپاره د تودوخې مثالی حد د 50 او 70 درجو سانتی ګراد ترمنځ دی.
پایلو وښودله چې انزایم په pH 3.0 کې تر ټولو لوړ فعالیت ښودلی، په pH 3.5 کې 94٪ فعالیت ته رسیدلی. په هرصورت، دا د 2.5 څخه تر 7.0 پورې د pH پراخه حد کې فعال پاتې شو (شکل 2b). سربیره پردې، دا د غیر جانبدار یا الکلین شرایطو په پرتله په تیزابي شرایطو کې لوړ فعالیت ښودلی. د دې فعالیت د 2.5 څخه تر 4.5 پورې د pH حد کې لږترلږه 77٪ پاتې شو، مګر یوازې په pH 7.0 کې نږدې 38٪ ته ورسید. د *Trametes polyzona* WRF03 څخه د لاکاس لپاره غوره pH 4.533 و، کوم چې د *Trametes polyzona* KU-RNW02737، *Trichoderma harzanium* 39، *Pleurotus* sp. 40، او *Trametes hirsuta* 41 څخه د لاکاس لپاره pH سره ورته دی. په هرصورت، د چیرین او نورو لخوا د مطالعې له مخې.42، د *پولیمورفا f. sp.* WR710-1 څخه د لاکیس لپاره غوره pH 2.2 دی، پداسې حال کې چې د *پولیمورفا f. sp.* IBL-04 څخه د لاکیس لپاره غوره pH 5.043 دی. د T2/T3 لاکیس د مسو اتومونو سره د هایدروکسایډ انیونونو (لاکیس مخنیوی کونکي) تړل ممکن د بې طرفه یا الکلین pH شرایطو لاندې د لاکیس فعالیت کمیدو لامل وي. دا ممکن د T1 مرکز څخه T2/T3 مرکز ته د داخلي الکترون لیږد ګډوډ کړي، له دې املهمحدودولد انزایم فعالیت ۲۳،۴۴
په مختلفو تودوخه کې د انزایم د انکیوبیشن کولو سره، دا وموندل شوه چې د انکیوبیشن وخت او تودوخه دواړه د انزایم ثبات اغیزمن کوي. د پام وړ، د *Trametes polyzona* NRC 620 څخه لاکاس په 40 ℃ او 50 ℃ کې لوړ ثبات ښودلی، د 120 دقیقو وروسته په ترتیب سره د خپل لومړني فعالیت 68.33٪ او 59.61٪ ساتلی (شکل 3a). برعکس، د ورته شرایطو لاندې (40 ℃ او 50 ℃، 120 دقیقې)، د *Trametes polyzona* WRF03 څخه لاکاس په ترتیب سره د خپل فعالیت 64.38٪ او 42.92٪ ساتلی.33برعکس، د انکیوبیشن وخت او تودوخې زیاتوالي د *ټرامیټس پولی زونا* NRC 620 لاکیس ثبات کم کړ؛ د 60 دقیقو لپاره په 60 ℃ او 70 ℃ کې د انکیوبیشن وروسته، د هغې فعالیت په ترتیب سره 39.24٪ او 1.72٪ ته راټیټ شو (شکل 3a). د تجربوي پایلو سره سم، د *ټرامیټس پولی زونا* WRF03 څخه لاکیس د تودوخې درملنې پروسې په اوږدو کې په 40 او 50 ℃ کې لوړ ثبات ښودلی.33په ورته ډول، Lueangjaroenkit et۳۷او چیرین اوالف.۴۲د ټرامیټس پولیزونا KURNW027 او ټرامیټس پولیزونا WR710-1 څخه د لاکاسونو ثبات په ترتیب سره د 50 درجو سانتی ګراد په تودوخه کې د 1 ساعت لپاره راپور ورکړ. د بایو ټیکنالوژیکي مختلفو برخو کې د تطبیق وړ ګټور بایو کتلست په توګه، لاکاس باید د تودوخې په پراخه لړۍ کې ښه ثبات او فعالیت ولري.
د *Pleurotus ostreatus* NRC 620 څخه د لاکیس ترموسټاتیک ثبات (a) او د pH ثبات (b). د ترموسټاتیک ثبات د انزایم محلول په 0.05 M سوډیم فاسفیټ بفر (pH 7.0) کې په ترتیب سره د 40، 50، 60، او 70 °C کې د 2 ساعتونو لپاره د انکیوبیټ کولو له لارې ارزول شوی. د pH ثبات د انزایم محلول په 0.1 M سیټریټ بفر او ټریس بفر (pH 3، 4، 6، او 7) کې په 40 °C کې د 2 ساعتونو لپاره د انکیوبیټ کولو له لارې ارزول شوی. د پاتې فعالیت محاسبه د ABTS په کارولو سره د انکیوبیشن وروسته د سبسټریټ په توګه محاسبه شوې.
د انزایمونو د کارولو او ذخیره کولو لپاره د غوره شرایطو د ټاکلو لپاره، موږ د لاکیس ثبات باندې د pH اغیزې وڅیړلې. د مختلفو pH ارزښتونو سره مخ کیدل د پروټین جوړښت ثبات باندې د پام وړ اغیزه وکړه، په دې توګه د انزایم مالیکول ثبات او فعالیت اغیزمن کړ. پایلو وښودله چې انزایم د تیزابي شرایطو لاندې لږ ثبات درلود، پداسې حال کې چې دا د لوړ pH ارزښتونو (غیر جانبدار او الکلین سیمو) کې غوره ثبات ښودلی. د 7.0، 6.0، 4.0، او 3.0 pH ارزښتونو کې، د 120 دقیقو وروسته د انزایم ساتلو کچه په ترتیب سره نږدې 100٪، 62.54٪، 52.39٪، او 11.14٪ وه (انځور 3b). *سټرومبس ملټیسس* WRF03 لاکیس د غیر جانبدار pH ارزښتونو (5.5-6.5) کې لوړ ثبات او د تیزابي pH ارزښتونو (4.0 څخه ښکته) کې ټیټ ثبات ښودلی. د ۱۲۰ دقیقو وروسته د ۵.۵، ۶.۰ او ۶.۵ pH ارزښتونو سره، د انزایمونو د ساتلو کچه په ترتیب سره نږدې ۸۲٪، ۱۰۰٪، او ۹۳٪ وه.33خیرین او نور.42یادونه وشوه چې د ټرامیټس پولیزونا WR710-1 څخه لیکاس د 6.0 څخه تر 7.0 پورې د pH حد کې مستحکم و، پداسې حال کې چې سید او نور.45ښودلې چې لاکیس د بې طرفه pH شرایطو لاندې ډیر مستحکم و. په هرصورت، د سیرینا یونیکلور څخه لاکیس هم د الکلین شرایطو لاندې ثبات ښودلی (pH 9.0)46. هغه لاکاسونه چې مطالعه شوي د pH په پراخه لړۍ کې لوړ ثبات ښیې. دا ممکن د صنعتي غوښتنلیکونو لپاره یو مهم ځانګړتیا وي.
څرنګه چې ځینې فلزي ایونونه د انزایمونو په فعالیت باندې محرک او مخنیوی دواړه اغیزې لري، نو د انزایمونو په فعالیت باندې د دوی اغیزې باید په صنعتي غوښتنلیکونو کې په پام کې ونیول شي. دا خورا مهم دی ځکه چې فلزي ایونونه عام چاپیریالي ککړونکي دي چې کولی شي د حجرو څخه بهر انزایمونو ثبات او ترکیب اغیزمن کړي.47د *Pleurotus ostreatus* NRC 620 څخه په لاکیس باندې د څو فلزي ایونونو اغیزو د څیړنې لپاره، موږ اړونده تجربې ترسره کړې. لکه څنګه چې په شکل 4 کې ښودل شوي، د کارول شوي فلز ډول پورې اړه لري، د فلزي ایون غلظت له 2.5 mM څخه 10 mM ته لوړول د انزایم فعالیت منفي اغیزه کړې. د مثال په توګه،مګ²⁺ , کو²⁺ , زنبق⁺، اوکواډورکولی شي د انزایم فعالیت هڅوي او فعال کړي، پداسې حال کې چېنا⁺ , من²⁺ , کای²⁺، اوک⁺کولی شي د انزایم فعالیت مخه ونیسي. د 10 ملي میتر په غلظت کې، Cu²⁺ او Mg²⁺ آیونونه د *Pleurotus ostreatus* NRC 620 څخه د لاکیس فعالیت خورا قوي فعالونکي وو، چې په ترتیب سره یې د فعالولو کچه نږدې 34٪ او 20٪ چمتو کوله. په هرصورت، د 10 ملي میتر په غلظت کې، Ca²⁺ آیونونه د لاکیس فعالیت خورا قوي مخنیوی کونکي وو، چې د انزایم فعالیت یې نږدې 60٪ کم کړ.
د پلیوروټس اوسټریټس NRC 620 لاکیس په فعالیت باندې د فلزي ایونونو اغیزه. لاکیس د 10 دقیقو لپاره د سوډیم فاسفیټ بفر (0.05 M، pH 7.0) کې د 2.5 mM او 10 mM غلظت کې مختلف فلزي ایونونه درلودل. بیا عکس العمل د سبسټریټ (ABTS) اضافه کولو سره پیل شو، وروسته له هغه چې نسبي فعالیت اندازه شو.
زموږ پایلې د نورو لیکوالانو سره سمون لري چې وموندله چې Mg²⁺ او Cu²⁺ د *Trametes polyzona* WRF03³ فعالیت زیاتوي. Castaño et al.⁴⁸ وموندله چې د *Xylaria* sp څخه لاکیس تر یوې اندازې پورې د مسو ایونونو (Cu²⁺) لخوا هڅول کیږي. سربیره پردې، Foroutanfar et al.⁴⁹ او Si et al.⁵⁰ په ترتیب سره د *Paraconiothyrium variabile* او *Trametes pubescens* څخه لاکیسونو باندې ورته مطالعات ترسره کړل. د دې انزایم ډول II د مسو تړلو سایټ (T2) په ورکړل شوي غلظت کې د Cu²⁺ سره مشبوع کیدی شي، کوم چې ممکن د Cu²⁺³⁹ لوړ غلظت کې د لاکیس فعالیت محرک تشریح کړي. څرنګه چې د سپینو روټ فنګسي لیکیسونه اکسیډیزونه دي چې د مسو ډیری اتومونه لري، د لیکیس فعالیت باندې د مسو ایونونو اغیزې متنوع دي او د محرک او مخنیوي څخه تر غیر جانبدار پورې دي.⁵¹ برعکس، ژو او نور[52]راپور ورکړ چېکواډورد تایوان د ځمکې لاندې دیمیت (Odontotermes formosanus) د لکیس فعالیت مخه ونیوله. په هرصورت، د سیرینا sp. HYB07 لکیس[53]او کلیټوسیب میکسیما[54]د مسو ایونونو لخوا اغیزمن شوي نه وو.
د سبسټریټ ځانګړتیا د هغې د متحرک پیرامیټرو (Km او Vmax) لخوا ښودل شوې وه؛ څومره چې د سبسټریټ تړل انزایم سره قوي وي، د Km ارزښت ټیټ وي او د سبسټریټ ځانګړتیا لوړه وي.۳،۲۱،۵۵د *Pleurotus ostreatus* NRC 620 څخه د لاکیس کاینټیک پیرامیټرونه (Km او Vmax) د ګراف پیډ پریزم 6.0 سافټویر په کارولو سره د لاین ویور-برک پلاټ پلاټ کولو له لارې ټاکل شوي (شکل 5). کله چې ABTS د سبسټریټ په توګه کارول کیده، پایلې 1.99 mM او 16217 μmol وې.دقیقه¹ ل⁻¹،په ترتیب سره. السید او نور.21راپور ورکړ چې د ABTS اکسیډیشن لپاره د Km ارزښتونه په ترتیب سره 0.1 mM او 0.064 mM وو، چې د ABTS لپاره د Lac A او Lac B ایزونزایمونو لوړ تړاو په ګوته کوي. سربیره پردې، د Vmax ارزښتونه 0.182 μmol وودقیقه¹او 0.603 μmolدقیقه¹په ترتیب سره. ترلاسه شوی کیلومتر ارزښت د ټرامیټس پولیزونا WRF03 (8.66 mM) په پرتله ټیټ و؛ سربیره پردې، د دوی Vmax ارزښت (1429 mmol min⁻¹) هم وښکتهکله چې ABTS د سبسټریټ په توګه کاروئ.33 په ورته ډول، د لینټینس سکوروسولوس MR13 او ټرامیټس sp. AH28-2 لاکیس غلظت Km ارزښتونه په ترتیب سره 0.0714 mM او 0.025 mM وو، او د Vmax ارزښتونه 0.0091 mM min−1 او 0.67 mM min−1 mg−1 وو (د ABTS په پرتله)په ترتیب سره.۵۶،۵۷
د *Pleurotus ostreatus* NRC 620 څخه د لاکیس په فعالیت باندې د ABTS غلظت اغیز وڅیړل شو، او د ABTS غلظت په مقابل کې د لومړني تعامل سرعت د متقابل لین ویور-برک پلاټ پلاټ شو. د لاکیس د مختلف غلظت (0.025–3.0 mM) سره د ABTS د اکسیډیشن تعامل په pH 4.5 کې اندازه شو ترڅو د متحرک پیرامیټرې (Vmax او Km) وټاکي. د مایکلیس-مینټین متحرک ثابتونه د تعامل سرعت د متقابل لین ویور-برک پلاټ په کارولو سره د سبسټریټ غلظت په مقابل کې محاسبه شول. متحرک ثابتونه د ګراف پیډ پریزم 6.01 سافټویر په کارولو سره د لاین ویور-برک پلاټ څخه محاسبه شول.
دودیز روښانه کوونکي انزایمونه، لکه پیکټیناز، د پیکټیک موادو هایدرولیز کوي، د واسکاسیټي او توربیډیټي کموي. دوی په مؤثره توګه ساختماني پولیساکرایډونه ماتوي او ډیری وختونه د نورو انزایمونو سره په ترکیب کې کارول کیږي، لکه سیلولوز او هیمیسیلوز، د حاصلاتو او شفافیت ښه کولو لپاره. په هرصورت، پیکټیناز په ځانګړي ډول د فینولیک مرکباتو په نښه نه کوي، کوم چې د توربیډیټي او اکسیډیټیو نسواري کولو اصلي مرسته کونکي دي، په ځانګړي توګه په جوسونو لکه مڼې او انګورو جوس کې.58برعکس، لاکاسونه د فینولیک مرکباتو اکسیډیشن هڅوي، دوی په لویو، نه حل کېدونکو مالیکولونو کې پولیمر کوي چې د رسوب یا فلټریشن له لارې لرې کیدی شي. دا میکانیزم نه یوازې شفافیت ښه کوي بلکه د فینولیک مرکباتو له امله رامینځته شوي اکسیډیټیو نسواري کیدو احتمال کمولو سره د جوس د شیلف ژوند هم اوږدوي. سربیره پردې، د لاکاس پر بنسټ د وضاحت پروسې د نرم پروسس شرایطو لاندې ترسره کیدی شي (pH 3.5-5.5، د تودوخې 25-40 °C)، دوی د نازک جوسونو لپاره مناسب کوي پرته لدې چې د دوی تغذیه یا ارګانولیپټیک ملکیتونو سره موافقت وکړي.59مطالعاتو ښودلې چې د پیکټیناز درملنه کولی شي په 1-2 ساعتونو کې جوس روښانه کړي، پداسې حال کې چې د لاکیس درملنه معمولا د فینولیک مرکباتو په بشپړ ډول کمولو لپاره اوږد غبرګون وخت (3-6 ساعته) ته اړتیا لري. په هرصورت، دا پروسه د انزایم د بې حرکت کولو یا د میخانیکي وضاحت میتودونو سره د لاکیس یوځای کولو سره غوره کیدی شي.60په دې څیړنه کې، د خام استخراج د انزایم پروفایل کولو د پام وړ لاکیس او α-امیلیز فعالیتونه څرګند کړل، پداسې حال کې چې د پیکټیناز او زایلاناز فعالیتونه خورا ټیټ وو، او د سیلولوز فعالیت نه و موندل شوی. له همدې امله، د توربیډیټي او فینولیک مینځپانګې کمښت په عمده توګه د لاکیس د عمل له امله و، پداسې حال کې چې د واسکاسیټي بدلون ممکن په جزوي ډول د امیلیز د عمل له امله وي.
جدول ۱ د تازه کښل شوي مڼې جوس او لاکیس درملنې شویو نمونو فزیکي کیمیاوي پیرامیټرې ښیې. پایلو وښودله چې د تازه کښل شوي مڼې جوس (۷۱.۵۹٪) حاصل د لاکیس درملنې شویو نمونو (۸۷.۳۴٪) په پرتله ټیټ و. دا پایلې د پیلنیک او نارنج موندنو سره سمون لري.61، چا اشاره وکړه چې د میوو پروسس کې د انزایمونو کارول کولی شي د جوس حاصل زیات کړي، فلټریشن ښه کړي، او د غلظت لپاره لوړ کیفیت لرونکی، شفاف جوس ترلاسه کړي. د جوس حاصلاتو کې زیاتوالی په عمده توګه په جوس کې د محلول شوي شکرو د مینځپانګې د زیاتوالي له امله دی. د میوو د انزایمیک هایدرولیسس په جریان کې، د محصول د حجرو دیوالونو کې میسوګلیا او پیکټین له منځه ځي او په محلول شوي موادو لکه بې طرفه شکرو او اسیدونو بدلیږي.۶۲.د انزایم سره درملنه شوي د مڼو د جوس pH ارزښت د کنټرول ګروپ په پرتله د پام وړ ټیټ و (P < 0.05)، او د دواړو ډلو pH ارزښت د ذخیره کولو پرمهال د پام وړ لوړ شو (جدول 1). دا پایلې د مارک او نورو سره سمون لري.63، چا یادونه وکړه چې د کاجو د میوو جوس pH د تودوخې درملنې وروسته د ذخیره کولو وروسته کم شو. د انزایم درملنې وروسته د پیکټین تخریب او ګالکټورونیک اسید جوړښت ممکن د ذخیره کولو پرمهال د pH زیاتوالي لپاره مسؤل وي. د انزایم درملنې نمونو pH د ذخیره کولو په اوږدو کې د 4.05 او 4.31 ترمنځ پاتې شو، پداسې حال کې چې د غیر درملنې شوي مڼې جوس pH د 4.12 او 4.33 ترمنځ و.
د غیر درملنې شوي او لاکیس درملنې شوي نمونو ټول تیزابیت (TA) د ذخیره کولو وخت زیاتوالي سره د کمیدو رجحان ښودلی (جدول 1). د تیزابیت کمښت د کاربوهایډریټونو یا انزایمیک تعاملاتو ته د عضوي اسیدونو بدلون، او همدارنګه د جوس ذخیره کولو پرمهال اکسیډیشن ته منسوب شوی.64د کنټرول شوي مڼې جوس او انزایم سره درملنه شوي نمونو ټول تیزابیت د نورو جوسونو په پرتله ټیټ و (د سټرابیري جوس 0.9٪، د آلو بخارا جوس 2.2٪، د کمکوټ جوس 1.0٪، د زردالو جوس 2.4٪، د نارنج جوس 0.8٪)، مګر د نورو جوسونو سره ورته و (د مثال په توګه، د ناک جوس 0.3٪).62د تازه کښل شوي مڼې په جوس کې دا توپیرونه ممکن د مختلفو عواملو له امله وي لکه د ودې شرایط، جینیاتي عوامل، د پختګۍ کچه، او د پروسس طریقې.65د کنټرول او لاکیس درملنې شوي مڼې جوس د ټول تیزابیت کمښت د سینګ او نورو لخوا وړاندې شوي پایلو سره مطابقت لري.66د ۷۴ ورځو ذخیره کولو وروسته د جن نوو د مڼو د جوس د ټول تیزابیت کمښت په اړه. له بلې خوا، اوشمیانسکي او ووجډیلو67د دودیزو وضاحت میتودونو اغیزې مطالعې پرمهال د مڼې د جوس په تیزابیت کې کوم د پام وړ بدلون ونه موند.
هغه پایلې چې په جدول ۱ کې وړاندې شوي ښیي چې د لاکیس درملنې شوي مڼې جوس ټول محلول شوي جامد مواد (TSS) ارزښت د غیر درملنې شوي نمونې په پرتله لوړ و. دا پایلې د خپرو شویو مطالعاتو سره مطابقت لري.۶۸سربیره پردې، جدول ۱ ښیي چې د کنټرول مڼې د جوس ګروپ TSS ارزښت په لومړني وخت کې ۹.۵۸ و او د ذخیره کولو دورې په پای کې ۱۱.۰۵ ته ورسید. دا ارزښتونه د حمید او نورو لخوا راپور شوي د تازه مڼې د جوس د TSS ارزښتونو څخه ټیټ دي.۶۹(په ترتیب سره ۱۱.۲ او ۱۱.۸۰). د لاکیس سره درملنه شوي د مڼو د جوس نمونو د TSS ارزښت د پام وړ لوړ شو، چې له ۱۱.۲۳ څخه پیل شو او د ۴ درجو سانتی ګراد په تودوخه کې د دوه اونیو ذخیره کولو وروسته ۱۲.۹۳ ته ورسید (جدول ۱). د ذخیره کولو پرمهال د TSS ورته زیاتوالی د لیمو میوو، لیمو او خوږو نارنجونو کې هم لیدل شوی. د ذخیره کولو پرمهال د ټول محلول شوي جامد موادو (TSS) زیاتوالی ممکن د پولی ساکرایډونو (نشایسته) څخه مونو ساکرایډونو (شکر) ته د هایدرولیسس، د جوس ډیهایډریشن له امله د غلظت زیاتوالي، او په جوس کې د پیکټین د محلول شوي جامد موادو ته د تخریب له امله وي. د ټول محلول شوي جامد موادو (TSS) زیاتوالی احتمال لري د محلول شوي شکرو د زیاتوالي له امله وي، کوم چې ممکن د پیکټین یا سیلولوز څخه د پیکټین یا سیلولوز لخوا محلول شوي شکرو ته د بدلون له امله رامینځته شي، لکه څنګه چې د حامد او نورو لخوا راپور شوی.۶۹.د مڼو د جوس په ځانګړتیاوو باندې د لاکیس اغیز په لید سره لیدل کیدی شي، ځکه چې لاکیس سره درملنه شوي د مڼو جوس د غیر درملنې شوي جوس په پرتله ښه جریان او ټیټ واسکاسیټي ښیې. دا مشاهده په جدول 1 کې ثبت شوې ده؛ د انزایم سره درملنه شوي نمونې واسکاسیټي 1.87 cP وه، پداسې حال کې چې د کنټرول نمونې واسکاسیټي 2.95 cP وه. په واسکاسیټي کې دا د پام وړ کمښت احتمال لري د پیکټین په څیر موادو د اوبو ساتلو لوړ ظرفیت او د یو همغږي شبکې جوړښت رامینځته کیدو له امله وي.
په دې څیړنه کې، د مڼې د جوس د نسواري کولو شاخص (BI) باندې د لاکیس اغیز د سپیکٹروفوټومیټر په کارولو سره د 420 nm په جذب اندازه کولو سره وڅیړل شو. پایلې په جدول 1 کې ښودل شوي. د ذخیره کولو پرمهال، د درملنې شوي او غیر درملنې شوي ګروپونو کې د مڼې د جوس نمونو BI د تدریجي زیاتوالي رجحان ښودلی. BI د نسواري کولو درجې منعکس کوي او کولی شي دیو مهمد انزایمیک او غیر انزایمیک نسواري تعاملاتو شاخص. د ذخیره کولو په جریان کې جذب د پام وړ زیات شو (P < 0.05). د ذخیره کولو په پای کې،A420 د لوړ کیفیت لرونکي موټرسایکلونهد کنټرول او انزایم درملنې ګروپونو کې د مڼو د جوس نمونو ارزښت په ترتیب سره شاوخوا 217٪ او 121٪ زیات شوی (جدول 1). پایلې ښیي چې د انزایم درملنه کولی شي په مؤثره توګه د نسواري کیدو کچه شاوخوا 56٪ کمه کړي. د بیزرا او نورو پایلې.[19]] زموږ د پایلو سره سم دي؛ دوی د مڼې جوس روښانه کولو لپاره د لاکیس-ګلوټارالډیهایډ-ناریل فایبر کارولی، چې د هغې اصلي رنګ یې 61٪ کم کړی.
که څه هم د میوو په جوسونو کې پولیفینولونه د انسان په بدن مثبت تغذیه او معالجوي اغیزې لري، دوی کولی شي د پروټینونو سره هم عکس العمل وښيي، د جوس ورېځ، رسوب یا خړپړتیا رامینځته کوي، په دې توګه د محصول خوند او بوی بدلوي او د هغې د شیلف ژوند کموي.71د دې څېړنې موخه دا وه چې د مڼو د جوس د فینولیک مرکباتو کچه په خوندي ډول کمه کړي چې د Pleurotus ostreatus NRC 620 څخه د لاکیس په کارولو سره کارول کیږي. هغه پایلې چې په جدول 1 کې وړاندې شوي ښیي چې د لاکیس سره درملنه شوي د مڼو د جوس ټول فینولیک مرکبات د 4 درجو سانتی ګراد په ذخیره کولو دمخه د پام وړ کم شوي وو. سربیره پردې، د مطالعې شوي دواړو نمونو کې د ذخیره کولو پرمهال د فینولیک مرکباتو ټول مواد هم کم شوي (جدول 1). د سانډري او نورو لخوا څیړنه.72ښودلې چې د انزایم سره درملنه شوي د مڼې جوس کولی شي خپل انټي اکسیډنټ فعالیت او د فینولیک مرکب مینځپانګه وساتي. په هرصورت، د لیټرا او نورو لخوا د یوې مطالعې پایلې.73ښودل شوي چې د نارنج جوس د فنګسي لیکیس سره درملنه کولی شي په هغې کې د فینولیک مرکباتو مینځپانګه تر 45٪ پورې کمه کړي.
د فینولیک مرکباتو ځانګړتیاوې ښودل شوي لکه د آزاد رادیکالونو پاکول، د واحد اکسیجن کمول او قوی کول، د هایدروجن اتوم لیږد، او آزاد رادیکالونو ته د الکترون بسپنه، چې دوی قوي انټي اکسیډنټ جوړوي.74له همدې امله، پدې څیړنه کې، د DPPH او FRAP پر بنسټ میتودونه د 14 ورځو لپاره په یخچال کې ساتل شوي د مڼو د جوس د انټي اکسیډنټ فعالیت باندې د لاکیس اغیز ارزولو لپاره کارول شوي (جدول 2). دواړو میتودونو د ذخیره کولو پرمهال د انټي اکسیډنټ فعالیت کې زیاتوالی ښودلی، کوم چې ممکن د وړیا فینولیک مرکباتو زیاتوالي یا د میلارډ عکس العمل محصولاتو (MRPs) رامینځته کیدو له امله وي، د میلارډ عکس العمل محصولات احتمال لري د انټي اکسیډنټ فعالیت زیاتوالي لامل وي.75د نسواري کولو غیر انزایمیک تعاملات (د اسکوربیک اسید تخریب، د میلارډ تعاملات، او د شکرو د تیزاب کتلست شوي تخریب په شمول) نسواري رنګونه (میلانوایډین) تولیدوي. د اسکوربیک اسید د تخریب منځني محصولات او د شکر د تخریب محصولات (لکه کاربونیل مرکبات) کولی شي د میلارډ تعاملاتو له لارې د امینو اسیدونو سره تعامل وکړي.76که څه هم د ذخیره کولو پرمهال د میوو او سبزیجاتو نسواري رنګ په پراخه کچه مطالعه شوی، خو د دې تعاملاتو په اړه زموږ پوهه محدوده پاتې ده.77د FRAP میتود په پرتله، د لاکیس سره درملنه شوي مڼې جوس د DPPH میتود لخوا د انټي اکسیډنټ فعالیت د پام وړ ټیټ ښودلی (جدول 2)، او د ټولو نمونو انټي اکسیډنټ فعالیت د ذخیره کولو وخت زیاتوالي سره د پام وړ زیات شوی. پدې څیړنه کې د انټي اکسیډنټ فعالیت ټاکلو لپاره دوه مختلف میتودونه کارول شوي ځکه چې د دوی اصول توپیر لري. د DPPH میتود د آزاد رادیکالونو بې طرفه کولو وړتیا اندازه کوي، پداسې حال کې چې د FRAP میتود د اوسپنې ایونونو کمولو وړتیا اندازه کوي. له همدې امله، سپارښتنه کیږي چې د انټي اکسیډنټ فعالیت ټاکلو لپاره ډیری میتودونه وکاروئ ترڅو د مطالعې شوي نمونو انټي اکسیډنټ فعالیت ښه پوه شي.78
د دې څېړنې یوه مهمه موندنه دا ده چې *Pleurotus ostreatus* laccase NRC 620 په 70 درجو سانتي ګراد او pH 3.0 کې غوره فعالیت ښیې. د نورو فنګسي لاکاسونو په پرتله چې معمولا د جوس روښانه کولو لپاره کارول کیږي، لکه *Trametes versicolor* او *Ganoderma lucidum* لاکاسونه، *P. ostreatus* NRC 620 لوړ حرارتي ثبات او ډیر تیزابي pH ښیې. د *Trametes versicolor* او *Ganoderma lucidum* څخه لاکاسونه معمولا د 50-60 درجو سانتي ګراد په حد کې او د 3.5 او 5.0 ترمنځ pH ارزښتونو کې غوره فعالیت ښیې. دا توپیر ممکن د جوس روښانه کولو موثریت ښه کولو کې مرسته وکړي، په ځانګړي توګه د تیزابي جوسونو لپاره چیرې چې د ټیټ pH ارزښتونو کې ثبات خورا مهم دی. د *P. ځانګړی ځانګړتیا د نورو مطالعه شوي فنګسي لاکاسونو په پرتله، *Pleurotus ostreatus* NRC 620 د ډیرو ننګونو شرایطو لاندې په مؤثره توګه د فعالیت کولو وړتیا ښیې. د دې لوړ مطلوب فعالیت تودوخه په صنعتي غوښتنلیکونو کې احتمالي ګټې وړاندیز کوي، لکه د چټک غبرګون کچه او د مایکروبیل ککړتیا کمول. د دې ټیټ pH، کوم چې د ډیری جوسونو تیزابي طبیعت سره مناسب دی، ممکن د جوس روښانه کولو پروسو کې ګټور وي. دا پایلې د لوی پیمانه غوښتنلیک لپاره نور سپړنه توجیه کوي، چې *Pleurotus ostreatus* NRC 620 د دودیزو فنګسي لاکیس سرچینو لپاره یو عملي بدیل جوړوي. د تیرو مطالعاتو په پرتله، موږ وموندله چې غوره تودوخه 60 ° C ده او غوره pH 3.0 دی. د 80 دقیقو لپاره په 60 ° C کې د عکس العمل وروسته، *Ganoderma lucidum* لاکیس ساتل شوی46د کورنیاوتي او نیکیل په وینا، د هغې د فعالیت سلنه.۷۹80، *Ganoderma lucidum* انزایمونه په ۲۵ درجو سانتي ګراد او د pH ارزښتونه له ۵.۰ څخه تر ۸.۰ پورې غوره او منځنۍ ثبات ښیې، او په ۶.۰ او د ۱۰ څخه تر ۳۰ درجو سانتي ګراد پورې تودوخې کې ثبات ښیې. پدې څیړنه کې، موږ وموندله چې د *Pleurotus ostreatus* لپاره د انزایم فعالیت لپاره غوره pH او تودوخه په ترتیب سره ۳.۰ او ۷۰ درجو سانتي ګراد وه. د دوو ساعتونو لپاره په ۴۰ درجو سانتي ګراد او ۵۰ درجو سانتي ګراد کې د انکیوبیشن وروسته، انزایم په ترتیب سره د خپل فعالیت ۶۸.۳۳٪ او ۵۹.۶۱٪ ساتلی و. سربیره پردې، Pleurotus ostreatus NRC ۶۲۰ لاکیس د ۵۰ درجو سانتي ګراد څخه تر ۸۰ درجو سانتي ګراد پورې د تودوخې په پراخه لړۍ کې لوړ فعالیت ښودلی و، نږدې اعظمي فعالیت (۶۹٪–۹۸٪) ته رسیدلی و، چې اعظمي فعالیت یې په ۷۰ درجو سانتي ګراد کې لیدل شوی و.
په پایله کې، د اویسټر مشروم لاکیس NRC620، چې د جامد شرایطو لاندې ترلاسه شوی، د pH او تودوخې شرایطو په لړ کې غوره فعالیت او ثبات ښودلی، د نورو انزایم سرچینو په پرتله غوره ثبات ښیې. د 10 mM MgSO₄ او CuSO₄ اضافه کول د انزایم فعالیت په ترتیب سره نږدې 21٪ او 35٪ زیات کړ. کله چې د مڼې په جوس کې پروسس شي، انزایم pH او واسکاسیټي کمه کړه، پداسې حال کې چې د ذخیره کولو پرمهال د فینولیک مینځپانګه یوازې یو څه کمه شوه.
پایلې د خوړو په صنعت کې د لاکیس وړتیا تاییدوي، په ځانګړې توګه د مشروباتو په وضاحت کې. په ځانګړي ډول د فینولیک مرکباتو په ماتولو سره، لاکیس نه یوازې د کثافاتو کموي او شفافیت ښه کوي بلکې د نرمو عملیاتي شرایطو لاندې د میوو جوس کیفیت هم ساتي. د دودیزو روښانه کولو اجنټانو لکه جیلاتین، بینټونایټ، او سیلیکا جیل برعکس، لاکیس ضایعات نه تولیدوي یا د مشروباتو څخه خوندور بوی نه لرې کوي، چې دا د چاپیریال دوستانه او دوامداره انتخاب جوړوي. سربیره پردې، د نورو انزایمونو او فلټریشن میتودونو په پرتله، لاکیس د محصول کیفیت سره موافقت پرته هدفمند او ارزانه حل وړاندې کوي.
کیوموهیمبو، ایچ ډي او برنک، ایچ جي. د مسو لرونکي لاکاسونو غوښتنلیکونه او د حرکت کولو ستراتیژۍ؛ یوه بیاکتنه. هیلیون ۹، ای ۱۳۱۵۶ (۲۰۲۳).
د پوسټ وخت: دسمبر-۱۵-۲۰۲۵